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放射免疫分析的含义和工作原理

更新时间:2025-12-06&苍产蝉辫;&苍产蝉辫;&苍产蝉辫;&苍产蝉辫;&苍产蝉辫;&苍产蝉辫;点击次数:19

 

一、放射免疫是什么意思?

 

放射免疫是 “放射性核素标记" 与 “免疫反应" 两项技术的结合。

 

免疫:指利用抗原和抗体之间高度特异性的结合反应。就像一把钥匙只能开一把锁,一种抗体通常只识别并结合一种特定的抗原(待测物)。

放射:指使用放射性同位素(如您提到的碘-125)作为“标记"或“标签",为免疫反应提供一个可被高灵敏度探测的信号。

 

简单来说,放射免疫分析就是用放射性物质当“发光记号笔",来追踪和测量免疫反应中极微量的目标物质。

伽马放射免疫计数器500.jpg


 

它的两大主要分支是:

 

1. 放射免疫分析:标记的是抗原。

2. 免疫放射分析:标记的是抗体。

   (后文会详细解释区别)

 

二、核心工作原理:竞争性结合分析

 

以经典的放射免疫分析为例,其核心思想是 “竞争"。

 

想象一个场景:

 

固定数量的“座位":反应体系中加入有限数量的、针对待测物的特异性抗体(固定在试管壁或颗粒上)。

两种“竞争者":

已知量的“带标签的竞争者":用放射性同位素(如滨-125)标记的、与待测物结构相同的标记抗原。它是有放射性的。

未知量的“无标签的竞争者":样本中待测的真实抗原(如病人血液中的某种激素)。它是没有放射性的。

竞争规则:标记抗原和待测抗原会竞争性地去结合那数量有限的抗体“座位"。

 

关键逻辑(倒推关系):

 

如果样本中待测抗原浓度很高,它会“抢走"大部分抗体座位。

结果:能与抗体结合的标记抗原就变少。

最终,通过测量与抗体结合的放射性强度,就能反向推算出样本中待测抗原的浓度。

测量到的放射性越强,说明结合的标记抗原越多,也就意味着样本中的待测抗原越少。反之亦然。

 

这个过程可以用下图直观展示:

 

       

112.jpg


 

叁、关键步骤与设备角色

 

1. 孵育与竞争:将样本、标记抗原、抗体混合,在一定条件下孵育,让竞争反应充分进行。

2. 分离:这是最关键的一步。反应结束后,需要将与抗体结合的部分和未结合(游离)的部分分离开来。常用的分离方法有:离心(使用包被抗体的磁性颗粒或第二抗体)、吸附、过滤等。

3. 测量:将结合部分(或游离部分,通常测结合部分)放入伽马免疫计数器中。

仪器会探测标记同位素(如滨-125)发出的伽马射线,并给出计数率。

放射性强度与样本中待测抗原的浓度存在反比关系。

4. 定量:通过同时测量一系列已知浓度的标准品,可以绘制出一条标准曲线(以放射性强度为驰轴,标准品浓度为齿轴)。将未知样本测得的放射性强度代入曲线,即可计算出其精确浓度。

 

四、RIA 与 IRMA 的区别

 

搁滨础:如上所述,标记抗原,采用竞争法。适用于检测小分子抗原(如激素、药物)。

滨搁惭础:标记抗体,采用非竞争法(或称“夹心法")。

使用过量的标记抗体,直接“捕捉"样本中的抗原,形成“抗体-抗原-标记抗体"复合物。

量到的放射性强度与待测抗原浓度成正比(抗原越多,形成的复合物越多,放射性越强)。

灵敏度通常更高,适用于大分子蛋白质。

 

总结与意义

 

放射免疫分析的原理精髓在于:

利用放射性核素提供超高灵敏度的探测信号,利用抗原-抗体的特异性结合实现精准识别,再通过竞争或夹心的设计,将难以测量的生物分子浓度,转化为可以精确计数的放射性物理信号。

20世纪中后期,它是测量血液、体液中极微量物质(如激素、肿瘤标志物、病毒抗原)的金标准,灵敏度可达皮克级。您提到的伽马免疫计数器,正是为此而生的核心测量设备。

虽然如今许多检测已被更安全、快速的非放射性免疫方法(如化学发光、荧光免疫)所取代,但放射免疫的原理是现代所有免疫定量分析技术的基石,其设计思想依然深刻影响着体外诊断领域。


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